В чем заключается метод Коха

Метод Коха и метод Дригальского — основные методы посева микроорганизмов на питательную среду. Подробнее о каждом методе и о том, как рассчитать количество образовавшихся колоний, а также о других методах посева и выделения чистых культур микроорганизмов, расскажем далее.

1. Метод Коха
2. Метод Дригальского
3. Методы посева для получения изолированных колоний
4. Методы выделения чистых культур микроорганизмов
5. Полезные советы и выводы

Метод Коха

Метод Коха был предложен Р. Кохом и заключается в способности микроорганизмов под действием силы тяжести и под влиянием движения воздуха (вместе с частицами пыли и капельками аэрозоля) оседать на поверхность питательной среды в открытые чашки Петри. Чашки устанавливаются в точках отбора на горизонтальной поверхности.

Для проведения метода Коха необходимо:

1. Подготовить питательную среду и разлить ее в чашки Петри.
2. Разместить чашки в точках отбора на горизонтальной поверхности.
3. Оставить чашки на несколько часов для оседания микроорганизмов на поверхность питательной среды.
4. Инкубировать чашки при оптимальной температуре и влажности для роста микроорганизмов.

Количество образовавшихся колоний можно рассчитать по формуле: КОЕ = N / V, где N — количество образовавшихся колоний, V — объем использованной питательной среды.

Метод Дригальского

Метод посева Дригальского заключается в том, что бактериальный инокулят распределяют по поверхности чашки Петри с помощью шпателя, затем, не обжигая шпатель, переносят его на вторую чашку Петри, растирая по поверхности. Повторяют эту операцию третий раз (не обжигая шпатель).

Для проведения метода Дригальского необходимо:

1. Подготовить питательную среду и разлить ее в чашки Петри.
2. Взять шпатель и нанести на него бактериальный инокулят.
3. Распределить инокулят по поверхности питательной среды в первой чашке Петри.
4. Не обжигая шпатель, перенести его на вторую чашку Петри и растереть инокулят по поверхности.
5. Повторить операцию на третьей чашке Петри.

Количество образовавшихся колоний можно рассчитать по формуле: КОЕ = N / V, где N — количество образовавшихся колоний, V — объем использованной питательной среды.

Методы посева для получения изолированных колоний

С целью получения изолированных колоний на поверхности агара посев осуществляют различными методами:

1. Метод Дригальского — описан выше.
2. Метод истощающего штриха — заключается в том, что бактериальный инокулят наносят на поверхность питательной среды в виде штриха, затем с помощью шпателя растекают его по поверхности.
3. Метод «решетки» /«площадки» — заключается в том, что на поверхность питательной среды наносят специальную решетку или площадку, которая разделяет поверхность на отдельные сегменты. В каждый сегмент наносят бактериальный инокулят.
4. Метод последовательных разведений — заключается в том, что бактериальный инокулят разводят в серии последовательных разведений до тех пор, пока не получатся изолированные колонии.

Методы выделения чистых культур микроорганизмов

Для выделения чистых культур микроорганизмов используют различные методы:

1. Метод Пастера — заключается в том, что бактериальный инокулят разводят в серии последовательных разведений до тех пор, пока не получатся изолированные колонии. Затем каждую колонию переносят на отдельную питательную среду и выращивают до получения чистой культуры.
2. Метод Коха («пластинчатые разводки») — заключается в том, что на поверхность питательной среды наносят бактериальный инокулят в виде пластинчатых разводок. Каждая разводка представляет собой изолированную колонию микроорганизмов.
3. Метод Шукевича — заключается в том, что на поверхность питательной среды наносят бактериальный инокулят в виде капель, которые затем распределяют по поверхности с помощью шпателя.
4. Метод Вейнберга — заключается в том, что бактериальный инокулят разводят в серии последовательных разведений до тех пор, пока не получатся изолированные колонии. Затем каждую колонию переносят на отдельную питательную среду и выращивают до получения чистой культуры.
5. Метод Хангейта — заключается в том, что на поверхность питательной среды наносят бактериальный инокулят в виде капель, которые затем распределяют по поверхности с помощью шпателя. Затем на поверхность наносят специальный агар, который ингибирует рост всех микроорганизмов, кроме тех, которые находятся внутри капель.
6. Выделение отдельных клеток с помощью микроманипулятора — заключается в том, что отдельные клетки микроорганизмов выделяют с помощью микроскопа и микроманипулятора, затем переносят на отдельную питательную среду и выращивают до получения чистой культуры.

Полезные советы и выводы

1. При посеве микроорганизмов на питательную среду необходимо соблюдать правила асептики, чтобы избежать загрязнения среды другими микроорганизмами.
2. Для получения изолированных колоний микроорганизмов на поверхности агара можно использовать различные методы посева, такие как метод Дригальского, метод истощающего штриха, метод «решетки» /«площадки» или метод последовательных разведений.
3. Для выделения чистых культур микроорганизмов можно использовать различные методы, такие как метод Пастера, метод Коха («пластинчатые разводки»), метод Шукевича, метод Вейнберга, метод Хангейта или выделение отдельных клеток с помощью микроманипулятора.
4. При проведении методов посева и выделения чистых культур микроорганизмов необходимо соблюдать правила асептики и следовать инструкциям по проведению каждого метода.
5. Правильный подсчет количества образовавшихся колоний микроорганизмов позволяет оценить их концентрацию в исходном образце и определить эффективность методов посева и выделения чистых культур микроорганизмов.